Август 2014 г.: Барик обнаруживает связь TMPRSS2 [35] с заражением MERS
В августе 2014 года, исследуя коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV или MERS), Барик и другие исследователи из Шанхайского университета и Университета Миннесоты сравнили MERS с двумя близкородственными ему коронавирусами, известными как HKU4 и HKU5. Несмотря на некоторое сходство, Барик и другие показали, что белки-шипы HKU4 и HKU5 [36] не прикрепляются к человеческим клеткам и не инфицируют их. Однако белок-шип MERS прикрепляется к обнаруженному у человека клеточному рецептору, известному как дипептидилпептидаза 4 (DPP4) [37].
DPP4 также известен как аденозиндезаминазный комплексообразующий белок 2 или кластер дифференцировки 26 (CD26). Стимуляция DPP4 приводит к иммунному ответу и высвобождению воспалительных цитокинов [38]. Подобно гену рецептора ACE2, [ген] DPP4 также находится на X-хромосоме, что объясняет некоторые различия между мужчинами и женщинами при инфекциях SARSCoV-2 [39].
Неспособность MERS связываться с рецепторами ACE2 была подтверждена китайскими исследователями в 2020 году [40]. Это приводит нас к информации, предоставленной доктором Ли Мэн Янь, а именно, что SARS-CoV-1 [41] был генетически модифицированным (усиление функциональности) вирусом, который также являлся биологическим оружием, разработанным Коммунистической партией Китая (КПК), при этом SARS-CoV-2 является доработанной версией этого биологического оружия [42].
2015: Барик и Чжэнли-Ли объединяют вектор одного вируса и белок-шип другого
В июне 2015 года и Ши Чжэнли-Ли, и Ральф С. Барик, получившие финансирование от Питера Дашака из EcoHealth Alliance, а также финансирование от NIH (рецензировано и одобрено), объявили, что использовали обратную генетику [43] для создания химерного (сформированной из частей различных организмов) вируса:
Используя систему обратной генетики SARS-CoV, мы создали и охарактеризовали химерный вирус, экспрессирующий шип коронавируса летучих мышей SHC014 в адаптированном к мышам векторе SARS-CoV [44].
По словам Барика:
Этот вирус является высокопатогенным, и методы лечения, разработанные против исходного вируса SARS в 2002 году, и препараты ZMapp, используемые для борьбы с лихорадкой Эбола, не смогли нейтрализовать и взять под контроль этот конкретный вирус [45].
В оригинальной публикации выражались благодарности за финансирование этого исследования со стороны NIH, NIAID [46] и Национального фонда естественных наук Китая, а также выражались благодарности исследователям из Уханьского института вирусологии, Университета Северной Каролины и Медицинского отделения Техасского университета.
Однако в ней не была раскрыта информация о финансировании, которое они получили от EcoHealth Alliance Питера Дашака, Агентства США по международному развитию (USAID) и Центрального разведывательного управления США (ЦРУ).
20 ноября 2015 года это упущение было исправлено, и Nature Medicine опубликовала исправление [47] (исправление с дополнительной информацией), показывающее, что финансирование этого исследования поступило от USAID и ЦРУ (про ЦРУ в статье ничего нет, об этом пишет сайт по ссылке сомнительной надежности – прим. пер.):
В версии этой статьи, изначально опубликованной в Интернете, авторы не указали источник финансирования, финансирование USAIDEPT-PREDICT от EcoHealth Alliance, для Z.-L.S. Ошибка была исправлена в печатной, PDF и HTML версиях статьи [48].
Дополнительный [49] материал к этому исследованию, опубликованный Чжэнли-Ли и Бариком, показывает, что белок-шип вируса SHC014-CoV (SL-COV) [50], который поражает подковоносых летучих мышей, был объединен с вектором адаптированного к мышам SARS-CoV (MA15). В дополнение к объединению белка-шипа одного вируса с вектором другого вируса, Барик и Чжэнли-Ли вставили (изменили) четыре нуклеотида в открытую рамку считывания 1a (ORD1a) и открытую рамку считывания 1b (ORF1b) вирусного генома.
Эти нуклеотидные изменения показаны на следующем рисунке [51]. Эти вставки изменяют белки репликации, необходимые для создания этого химерного (усиление функциональности) вируса. Пятое изменение нуклеотида обнаружено в позиции 26428 в белке оболочки [52] ― изменение, которое оказалось важно для пересечения вирусом SARS-CoV-2 гематоэнцефалического барьера, после чего вирус может инфицировать и повредить мозг.
Исследование, как показано на следующем рисунке, финансировалось NIAID, NIH, USAID и EcoHealth Alliance. В нем конкретно указано, что это исследование усиления функциональности (GOF) было рассмотрено и одобрено NIH и показывает финансирование как Барика (R.S.B.), так и Чжэнли-Ли Ши (Z.-L.S.).
В аннотации к этому опубликованному исследованию Чжэнли-Ли и Барик, в частности, заявляют, что они создали при помощи усиления функциональности (химерный) вирус:
Используя систему обратной генетики SARS-CoV, мы создали и охарактеризовали химерный вирус, экспрессирующий шип коронавируса летучих мышей SHC014 в адаптированном к мышам векторе SARS-CoV [53].
Затем Чжэнли и Барик заявляют:
Кроме того, эксперименты in vivo демонстрируют репликацию химерного вируса в легких мыши с заметным патогенезом. Оценка доступных для SARS иммуно-терапевтических и профилактических средств показала низкую эффективность; подходы как моноклональных антител, так и вакцины не смогли нейтрализовать и защитить от заражения CoV, использующего новый белок-шип. На основе этих результатов мы синтетическим путем повторно получили инфекционный полноразмерный рекомбинантный вирус SHC014 и продемонстрировали надежную репликацию вируса как in vitro, так и in vivo.
В конце авторы (Барик и Чжэнли-Ли) пришли к выводу, что они создали более патогенный вирус:
Таким образом, по сравнению с шипом Урбани – MA15 CoV, SHC014-MA15 демонстрирует усиление патогенеза (рис. 1). На основании этих результатов, комиссии по научной оценке могут счесть аналогичные исследования по созданию химерных вирусов на основе циркулирующих штаммов слишком рискованными для осуществления, поскольку нельзя исключить повышенную патогенность на моделях млекопитающих.
В сочетании с ограничениями на адаптированные к мышам штаммы и на разработку моноклональных антител с использованием ускользающих мутантов, может быть серьезно ограничено продвижение вперед исследование возникновения CoV и эффективности терапии. Вместе эти данные и ограничения представляют собой пересечение опасений по поводу исследований усиления функциональности; потенциал для подготовки к будущим вспышкам и смягчения их последствий необходимо сопоставить с риском создания более опасных патогенов [54]. [Выделение добавлено.]
Их химерный (усиление функциональности) вирус был способен «реплицироваться в культурах дыхательных путей человека, вызывать патогенез… и ускользать от существующей терапии». В итоге исследователи, похоже, были больше обеспокоены тем, какие ограничения это может наложить на будущие исследования, которые они хотели бы провести, чем потенциальным вредом, который они могут нанести человечеству.
Многие люди с годами решают, что они знают, что лучше для человечества. Билл Гейтс неоднократно комментировал, что использование технологии сгруппированных с регулярными интервалами коротких палиндромных повторов (CRISPR) позволит «устранить нежелательные гены» и «потенциально заменить их на предпочтительные альтернативы» [55] ― концепция, которой на протяжении истории придерживались и другие, включая доктора Йозефа Менгеле:
Как и все врачи в Германии 1930-х годов, Менгеле подпадал под гитлеровскую концепцию немецкой медицины, которая отошла от традиционной роли по уходу за пациентом, объясняет Марвелл. В первую очередь врач несет ответственность перед нацией, а не перед отдельными пациентами. В рамках Weltanschauung фюрера врачи были «биологическими солдатами», приверженными делу обеспечения славной судьбы Германии, «очищая» население от «низшего» генетического материала [56].
Эта перспектива, кажется, пронизывает сегодняшнее общество.
Сентябрь 2015: Чжэнли и Барик перепроектируют (усиление функциональности) белок-шип HKU4 вируса MERS для повышения его инфицирующей способности у людей
Одновременно вводя белок-шип SHC014 в вектор CoV MA15 и добавляя пять нуклеотидных замен с усилением функциональности, Чжэнли и Барик работали над изменением усиления функциональности в белке-шипе вируса HKU4, также известном как коронавирус HKU4 летучих мышей Tylonycteris [57]. Как уже обсуждалось, HKU4 не заражает клетки человека. К концу этого исследования Барик и Чжэнли, взявшие вирус, который не мог инфицировать человеческие клетки, превратили его в вирус, который мог и заражал:
Чтобы оценить потенциальные генетические изменения, необходимые для того, чтобы HKU4 инфицировал клетки человека, мы перепроектировали шип HKU4, стремясь повысить его способность опосредовать проникновение вируса в клетки человека. С этой целью мы ввели две одиночные мутации S746R и N762A в шип HKU4… Более того, мутации в этих мотивах в шипах коронавируса продемонстрировали драматическое влияние на проникновение вируса в клетки человека.
Барик и Чжэнли продолжили:
Псевдовирусы HKU4, несущие либо перепроектированный мотив hPPC, либо перепроектированный мотив hECP, были способны проникать в клетки человека, в свою очередь псевдовирусы HKU4, несущие оба перепроектированных мотива протеазы человека, проникли в клетки человека… Две адаптивные к клеточным протеазам человека мутации превратили шип MERS-CoV из абсолютно не имеющего в полностью обладающего способностью опосредовать проникновение вируса в клетки человека [58]. [Выделение добавлено].
Это исследование усиления функциональности превратило неинфекционный коронавирус в инфекционный и было оплачено грантами NIH RO1AI089728 и RO1AI110700.
Несмотря на эти доказательства и деньги, направленные Питеру Дашаку из EcoHealth Alliance, Питер Дашак вместе с другими учеными предпринял целенаправленные и осознанные усилия, чтобы отвлечь внимание от лабораторного происхождения SARSCoV-2 и исследований по усилению функциональности.
Это усилие зашло так далеко, что в марте 2020 года он привлек ученых со всего мира [59], чтобы опровергнуть лабораторное происхождение, настаивая на том, что научное сообщество поддерживает версию Дашака и других о зоонозном [60] происхождении этого биологического оружия. Дашак завершил свое «заявление», заявив: «Мы заявляем об отсутствии конфликта интересов».
Когда Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отправила команду «экспертов» в Уханьский институт вирусологии (WIV) в январе 2021 года, Питер Дашак, который был единственным американцем в команде и возглавлял ее, убедил остальных членов команды в том, что отсутствующие данные WIV были «не относящимися к делу» [61].
Стремясь продемонстрировать свое неодобрение и опротестовать постоянно ухудшающуюся объективность наших научных журналов, я отказался оставаться в качестве внешнего клинического рецензента в Lancet в 2020 году, после почти двух десятилетий сотрудничества.
Невозможно не быть пораженным значительным объемом информации в опубликованной литературе, показывающей источники финансирования этих исследовательских проектов по усилению функциональности и тех, кто участвует в проведении экспериментов. Также нельзя оставаться в неведении об исследовании по усилению функциональности, проведенном на белке-шипе коронавирусов и SARS-CoV-2, и об усилиях в попытке задним числом cкрыть источник финансирования исследования [62].
Перевод осуществлен членом РВС Иваном Ивановым
Ссылки к главе 2
1. R. A. Flavell et al., “Site-Directed Mutagenesis: Generation of an Extracistronic Mutation in Bacteriophage QßRNA,” Journal of Molecular Biology 89, no. 2 (October 25, 1974): 255–72.
2. Charles Weissmann, “The End of the Road,” Landes Bioscience 6, no. 2 (2012): 970194, y.
3. M. M. Lai et al., “Recombination between Nonsegmented RNA Genomes of Murine Coronaviruses,” Journal of Virology 56 (1985): 449–56.
4. Kary B. Mullis et al., Process for Amplifying, Detecting, and/or Cloning Nucleic Acid Sequences, US Patent 4,683,195, 21; Tyler Durden, “Caught Red-Handed: CDC Changes Test Thresholds to Virtually Eliminate New COVID Cases among Vaxx’d,” ZeroHedge.com, May 23, 2021, https://www.zerohedge.com/covid-19/caught-red-handed-cdc-changes-test-th....
5. R. M. Fleming, “The Pathogenesis of Vascular Disease,” in Textbook of Angiology, ed. John C. Chang (New York: Springer Verlag, 1999), 787–98. doi:10.1007/978-1-4612-1190-7_64.
6. Хронические воспалительные заболевания включают болезнь коронарной артерии (болезнь сердца), сосудистую болезнь мозга (например, инсульт), гипертонию (высокое кровяное давление), сахарный диабет, ожирение и рак.
7. 20/20, April 16, 2004, “Hidden Heart Disease: Could a Simple, Inexpensive Test Save Your Life?,” aired April 16, 2004, on ABC; https://rumble.com/vkb7n1-inflammation-and-heart-disease-2020.html.
8. Richard M. Fleming and Matthew R. Fleming, “FMTVDM Quantitative Nuclear Imaging Finds Three Treatments for SARSCoV-2,” Biomedical Journal of Scientific and Medical Research 33, no. 4 (February 8, 2021): 26041– 83, doi:10.26717/BJSTR.2021.33.005443, https://biomedres.us/fulltexts/BJSTR.MS.ID.005443.php.
9. F. Almazán, “Engineering the Largest RNA Virus Genome as an Infectious Bacterial Artificial Chromosome,” Proceedings of the National Academy of Sciences 97, no. 10 (2000): 5516–21.
10. Ibid.
11. Boyd Yount, Kristopher M. Curtis, and Ralph S. Baric, “Strategy for Systematic Assembly of Large RNA and DNA Genomes: Transmissible Gastroenteritis Virus Model,” Journal of Virology 74, no. 22 (December 22, 2000): 10600–11.
12. Ibid.
13. Volker Thiel et al., “Infectious RNA Transcribed In Vitro from a cDNA Copy of the Human Coronavirus Genome Cloned in Vaccinia Virus,” Journal of General Virology 82 (June 2001): 1273–81.
14. Клетки MRC-5 (также известные как линия клеток № 5 Совета по медицинским исследованиям) была выращена из легочной ткани 14-недельного аботированного мужского зародыша европеоида.
15. Один из способов сделать это - это кластеры коротких палиндромных повторов с регулярными интервалами. One method for doing this is called Clusters of Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR).
16. Bredenbeek and Rice, 1992; Mandl et al., 1998.
17. Boyd Yount, Kristopher M. Curtis, and Ralph S. Baric, “Strategy for Systematic Assembly of Large RNA and DNA Genomes: Transmissible Gastroenteritis Virus Model,” Journal of Virology 74, no. 22 (December 22, 2000): 10600–11.
18. Boyd Yount et al., “Reverse Genetics with a Full-Length Infectious cDNA of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus,” Proceedings of the National Academy of Sciences 100, no. 22 (October 28, 2003): 12995–13000.
19. Возможность использовать обратную транскрипцию для получения кДНК из мРНК. The ability to use reverse transcription to make cDNA from mRNA.
20. Клетки Vero E6 ― линия клеток эпителия почек, взятых у африканской зеленой мартышки 27 марта 1962 года.
21. Boyd Yount et al., “Reverse Genetics with a Full-Length Infectious cDNA of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus,” Proceedings of the National Academy of Sciences 100, no. 22 (October 28, 2003): 12995–13000.
22. NCT04349410. Richard M. Fleming and Matthew R. Fleming, “FMTVDM Quantitative Nuclear Imaging Finds Three Treatments for SARS-Cov-2,” Biomedical Journal of Scientific and Medical Research 33, no. 4 (February 8, 2021): 26041–83, doi: 10.26717/BJSTR.2021.33.005443, https://biomedres.us/fulltexts/BJSTR.MS.ID.005443.php; Canrong Wu et al., “Analysis of Therapeutic Targets for SARS-CoV-2 and Discovery of Potential Drugs by Computational Methods,” Acta Pharmaceutica Sinica B 10, no. 5 (May 2020): 766–88; Satish Sagar et al., “Bromelain Inhibits SARS-CoV-2 Infection via Targeting ACE-2, TMPRSS2, and Spike Protein,” Clinical and Translational Medicine 11, no. 2 (February 2021): e281.
23. Liguo Zhang et al., “Reverse Transcribed SARS-CoV-2 RNA Can Integrate into the Genome of Cultured Human Cells and Can Be Expressed in Patient-Derived Tissues,” Proceedings of the National Academy of Sciences 118, no. 21 (May 25, 2021): e2105968118.
24. Qiuying Huang et al., “Preparation of Chimeric Armored RNA as a Versatile Calibrator for Multiple Virus Assays,” Clinical Chemistry 52, no. 7 (July 1, 2006): 1446–48 and Supplement A.
25. Commonly known as the People’s Revolutionary Government of the Republic of China. Since 2018, it has been superseded and duties transferred to the Kinmen-Matsu Joint Services, the National Development Council, and other ministries for the Executive Yuan (executive branch) of Taiwan.
26. Genome is the entire genetic code of an organism—for example, the SARSCoV-1 virus.
27. US Department of Health and Human Services, Coronavirus Isolated from Humans, Patent 7,220,852 B1, issued May 22, 2007.
28. US Food and Drug Administration, “In Vitro Diagnostics EUAs — Molecular Diagnostic Tests for SARS-CoV-2,” last updated July 19, 2021, https://www.fda.gov/medical-devices/coronavirus-disease-2019-covid-19-em....
29. Wuze Ren et al., “Difference in Receptor Usage between Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS) Coronavirus and SARS Like Coronavirus of Bat Origin,” Journal of Virology 82, no. 4 (February 2008): 1899–1907.
30. Yuxuan Hou et al., “Angiotensin-Converting Enzyme 2 (ACE2) Proteins of Different Bat Species Confer Variable Susceptibility to SARS-CoV Entry,” Archives of Virology 155, no. 10 (October 2010): 1563–69, doi: 10.1007/ s00705-010-0729-6.
31. PRRA ― буквенное обозначение четырех аминокислот, в частности пролина, аргинина, аргинина и аланина.
32. Asian-African animal species frequently used by those like Daszak who attempt to explain SARS-CoV-2 as a naturally occurring (zoonotic) virus.
33. Lisa E. Gralinski et al., “Mechanisms of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-Induced Acute Lung Injury,” mBio 4, no. 4 (August 6, 2013): e00271-13, doi:10.1128/mBio.00271-13.
34. Ibid.
35. TMPRSS2 is transmembrane protease serine 2. This enzyme, which breaks apart proteins, is found in humans. The gene for TMPRSS2 is found on human chromosome 21. See https://doi.org/10.1006/geno.1997.4845.
36. Xue Han et al., “Structure of the S1 Subunit C-Terminal Domain from Bat-Derived Coronavirus HKU5 Spike Protein,” Virology 507 (July 2017): 101–9.
37. Y. Yang et al., “Receptor Usage and Cell Entry of Bat Coronavirus HKU4 Provide Insight into Bat-to-Human Transmission of MERS Coronavirus,” Proceedings of the National Academy of Sciences 111, no. 34 (August 26, 2014): 12516–21.
38. R. M. Fleming, “The Pathogenesis of Vascular Disease,” in Textbook of Angiology, ed. John C. Chang (New York: Springer Verlag, 1999), 787–98. https://doi.org/10.1007/978-1-4612-1190-7_64.
39. William T. Gibson et al., “ACE 2 Coding Variants: A Potential XLinked Risk Factor for COVID-19 Disease,” BioRXiv (April 14, 2020), https://doi.org/10.1101/2020.04.05.026633.
40. Wanbo Tai et al., “Characterization of the Receptor-Binding Domain (RBD) of 2019 Novel Coronavirus: Implications for Development of RBD Protein as a Viral Attachment Inhibitor and Vaccine,” Cellular & Molecular Immunology 17, no. 6 (June 2020): 613–20.
41. SARS-CoV, now referred to as SARS-CoV-1, was first reported in China in February of 2003. See https://www.cdc.gov/sars/index.html.
42. “Lethal Deception,” Rumble.com, April 22, 2021. Video, 1:31:19, https://rumble.com/vfy3xf-lethal-deception.html.
43. Boyd Yount et al., “Reverse Genetics with a Full-Length Infectious cDNA of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus,” Proceedings of the National Academy of Sciences 100, no. 22 (October 28, 2003): 12995–13000; M. M. Becker, “Synthetic Recombinant Bat SARS-Like Coronavirus Is Infectious in Cultured Cells and in Mice,” Proceedings of the National Academy of Sciences 105, no. 50 (December 2008): 19944–49.
44. V. D. Menachery et al., “A SARS-Like Cluster of Circulating Bat Coronaviruses Shows Potential for Human Emergence,” Nature Medicine 21, no. 12 (2015): 1508–13.
45. “New SARS-Like Virus Can Jump Directly from Bats to Humans, No Treatment Available,” Gillings School of Global Public Health, November 9, 2015, https://sph.unc.edu/sph-news/new-sars-like-virus-can-jump-directly-from-....
46. That’s something Dr. Fauci now denies (see https://twitchy.com/samj-3930/2021/05/11/its-on-dr-fauci-did-not-like-se...), despite the publication acknowledging NIAID funding.
47. V. D. Menachery et al., “Corrigendum: A SARS-Like Cluster of Circulating Bat Coronaviruses Shows Potential for Human Emergence,” Nature Medicine 22, no. 4 (2016): 446.
48. Gordon Duff, “Documentary Proof: University of North Carolina Generated COVID-19,” State of the Nation (website), April 28, 2020, https://stateofthenation.co/?p=12668.
49. V. D. Menachery et al., “A SARS-Like Cluster of Circulating Bat Coronaviruses Shows Potential for Human Emergence,” Nature Medicine 21, no. 12 (2015): 1508–13, doi:10.1038/nm.3985.
50. Dr. Carlo Urbani was an Italian microbiologist and physician who first identified Severe Acute Respiratory (SARS) viruses and warned the WHO.
51. A = adenine, C = cytosine, G = guanine, T = thymine, and U (not shown here) = uracil.
52. Richard M. Fleming, Unmasking COVID — Part 1 (self-pub., 2020), Kindle, https://www.amazon.com/Unmasking-CoViD-Dr-Richard-Fleming-ebook/dp/B08N5....
53. V. D. Menachery et al., “A SARS-Like Cluster of Circulating Bat Coronaviruses Shows Potential for Human Emergence,” Nature Medicine 21, no. 12 (2015): 1508–13.
54. V. D. Menachery et al., “Corrigendum: A SARS-Like Cluster of Circulating Bat Coronaviruses Shows Potential for Human Emergence,” Nature Medicine 22, no. 4 (2016): 446.
55. Bill Gates said it would be a “‘tragedy’ to pass up a controversial, revolutionary gene-editing technology.” Article by Kevin Loria April 12, 2018 Insider.
56. Janet Levy, “Mengele’s Unethical Research Was Part of Existing Beliefs, Practice,” Jerusalem Post, August 6, 2020, https://www.jpost.com/israel-news/culture/mengeles-unethical-research-wa....
57. Y. Yang et al., “Two Mutations Were Critical for Bat-to-Human Transmission of Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus,” Journal of Virology 89, no. 17 (2015): 9119–23.
58. Ibid.
59. C. Calisher et al,, “Statement in Support of the Scientists, Public Health Professionals, and Medical Professionals of China Combating Covid-19,” Lancet 395 (2020): e42-43.
60. Zoonotic viruses are viruses spread from animals to people. See https://www.cdc.gov/onehealth/basics/zoonotic-diseases.html.
61. Andrew Kerr, “US Researcher with Chinese Ties Admits He Convinced WHO Team That Missing Wuhan Lab Data Was Irrelevant,” Daily Caller, March 10, 2021, https://dailycaller.com/2021/03/10/who-investigators-wuhan-lab-database-....
62. Sam Husseini, “EcoHealth Alliance Has Hidden Almost $40 Million in Pentagon Funding and Militarized Pandemic Science,” Independent Science News (website), December 16, 2020, https://www.independentsciencenews.org/news/peter-daszaks-ecohealth-alli....